Introducción

La gran demanda de productos como carne y lana derivados de especies animales menores como los ovinos, ha desencadenado un incremento vertiginoso de la ovino cultura durante los últimos años en Colombia (Orozco et al, 2009). La elevada pérdida económica por parasitismo gastrointestinal en las explotaciones ovinas se ha contrarrestado con la implementación de programas sanitarios tradicionales que se basan en el uso de productos químicos (Saumell et al, 2009); sin embargo, el uso inadecuado de estos productos ha generado problemas de resistencia por parte de las especies parasitarias, convirtiéndose en un inconveniente para el productor, ya que la ganancia de peso de los animales no es la adecuada ni la esperada en términos de rentabilidad, además de generar una dependencia total de un solo método de control parasitario que termina siendo poco sustentable y utilizable a largo plazo (Kemper et al, 2009), sin dejar atrás la posibilidad de crear desequilibrios ecológicos y ocasionar la presencia de residuos de medicamentos en subproductos como carne y lana.
Esta situación conlleva a la necesidad de explorar y evaluar estrategias de control no químicas como el manejo de la resistencia genética de los animales, resistencia inmunológica, administración de vegetales antihelmínticos, nutracéuticos y el control biológico, los cuales complementan los programas tradicionales permitiendo una disminución gradual de infección con una menor dependencia de productos químicos (Casillas-Aguilar et al, 2008).
El control biológico se constituye en una de las estrategias más prometedoras para un control sustentable de los nematodos gastrointestinales por lo que la búsqueda de formulaciones que vehiculicen su uso como método de control es motivo de investigación. La principal ventaja de esta estrategia biológica es la eficacia sin resistencia de los parásitos de ovinos de sistemas tradicionales, un método ecológico diseñado por el hombre para disminuir las poblaciones parasitarias a un nivel subclínico aceptable, conservando estas poblaciones en un nivel no perjudicial gracias a antagonistas vivos naturales (Sagüés et al, 2011). Sumado a esto como método de control biológico permite que los productos adquieran un valor agregado, ya que es conocida la preocupación de la tendencia en el mercado de consumir productos orgánicos que no pongan en riesgo la salud humana con residuos de agentes químicos (Torres-Acosta et al, 2012).

Control biológico

Teixeira et al. (2013) definen el control biológico como una estrategia ecológica cuyo objetivo es disminuir las poblaciones parasitarias a un nivel aceptable, buscando mantener las poblaciones parasitarias en un nivel no perjudicial basado en el comportamiento y acción de antagonistas naturales. Es importante entender el control biológico, como una medida de regulación cuyo objetivo no es acabar con el organismo diana, sino controlar su población reduciendo así sus efectos nocivos. Este mecanismo de acción es lo que permite diferenciar a este mecanismo de los antihelmínticos, cuyo propósito es eliminar la totalidad de los parásitos que se encuentran en el animal (Manueli et al, 1999; Mederos et al, 2012).
Entre las distintas alternativas estudiadas como posibles agentes de control biológico se encuentran artrópodos coprófagos, bacterias y hongos (Ribeiro Braga et al, 2010). Dentro de los últimos se encuentran los hifomicetos (hongos nematófagos) que son capaces de atrapar y digerir las formas libres de los nematodos que se encuentran en el suelo sin ser patógenos para los organismos que no son su blanco; sumado a los anterior, gran cantidad de estos hongos tienen la capacidad de producir esporas de resistencia o presentar fases saprofíticas en ausencia de sus hospedadores (Hongyan et al, 2007).
En la actualidad existen más de 200 especies de hongos nematófagos descritas; la mayoría pertenecientes a los denominados hongos imperfectos o deuteromycetes (Kelly et al, 2008; Maciel et al, 2009). Dichos hongos constituyen un grupo heterogéneo de gran propagación, viviendo normalmente en forma saprofítica y ocupando preferiblemente el suelo, donde pueden alimentarse de gran número de nematodos de vida libre, ya sea como recurso principal o secundario (Soto-Barrientos et al, 2011).
De acuerdo al modo en que utilizan a los nematodos como recurso nutritivo, los hongos nematófagos se dividen en depredadores, endoparásitos y ovicidas.

Depredadores

Son hongos saprófitos capaces de formar un sistema miceliar extensivo en el medio empleando como recurso nutritivo las fases de vida libre de los nematodos. Algunos de los géneros más importantes dentro de este grupo son Arthrobotrys, Dactylaria, Dactylella y Monacrosporium (Chandrawathani et al, 1999; Ribeiro Vilela et al, 2012). A través de mecanismos como la producción de un material adhesivo sobre las hifas y la formación de complejos anillos constrictores, los hongos depredadores son capaces de atrapar y consumir los estadios larvarios de los nematodos presentes en las heces y en el suelo (Arias et al, 2013). Existe un grupo abundante de hongos depredadores que utilizan como estrategia de captura la formación de redes tridimensionales adhesivas cubiertas por una capa mucilaginosa a la que quedan adheridos los nematodos. La producción de esta red parece estar estimulada por el forcejeo de los nematodos atrapados (Cruz et al, 2009).
El mecanismo de acción de los hongos nematófagos es una combinación de la liberación de enzimas hidrolíticas extracelulares como proteasas séricas, quitinasas y colagenasas que digieren la cutícula del nematodo y fuerza mecánica (órganos de captura) (Paz-Silva et al, 2011). Una hora después de la penetración, el hongo forma un bulbo infectivo en el interior del nematodo y en pocas horas ocupa completamente el cuerpo de este (Assis et al, 2013). El proceso de digestión puede llegar a durar hasta una semana, tras lo cual la hifa trófica se lisa y el hongo se desarrolla de nuevo saprofíticamente, hasta que la presencia de nematodos en el medio estimula nuevamente su actividad predadora (Burke et al, 2005).
Los géneros de nematodos parásitos de los ovinos, cuyas larvas son más móviles (Cooperia, Ostertagia y Haemonchus), estimulan una mayor producción de redes tridimensionales que aquellas larvas de movimientos más lentos, como Oesophagostomum (Assis et al, 2012). Las L1 y las L2 son más lentas en sus movimientos, pero más susceptibles de morir rápidamente que las L3, las que al mantener la vaina de la L2 obtienen más protección, y son más resistentes a la mortalidad (Paz-Silva et al, 2011).
En la investigación de hongos nematófagos para el control de los nematodos gastrointestinales, la mayoría de los trabajos se han centrado en las especies depredadoras, debido a que su carácter saprofítico permite el aislamiento y mantenimiento en cultivos puros, facilitando así su producción in vitro (Arias et al, 2013). Estos hongos han sido aislados en gran variedad de hábitats, especialmente en medios ricos en materia orgánica como pastos, estiércol o abono (Jackson y Miller, 2006). Entre las especies conocidas de hongos nematófagos, los Duddingtonia flagrans cumple con todas las características antes descritas y además, tiene la capacidad de atravesar el tracto gastrointestinal de los ovinos y otras especies domésticas como equinos, cerdos y bovinos, pudiendo germinar y luego reducir el número de larvas infectantes en materia fecal; la supervivencia en el tracto gastrointestinal se debe a que sus clamidosporas presentan una pared gruesa que les permite tolerar condiciones extremas (Ribeiro Braga et al, 2014). La temperatura óptima para el crecimiento y función predadora del hongo se sitúa entre 10 y 30 °C, alcanzando su máxima actividad para la formación de redes entre 25 y 28 °C; factores como luz, humedad, pH y la presencia de oxígeno, pueden también influir en la formación de elementos de captura (Paraud et al, 2005).
Es indispensable comprender que cualquier agente de control biológico debe resultar inocuo para el medio ambiente, por este motivo debe valorarse si la presencia masiva de clamidosporas, en las heces, puede alterar el equilibrio natural del ecosistema. Maciel et al (2010) observaron que la presencia de D. flagrans no provocó cambios en la fauna de nematodos del suelo, y concluyeron que el uso del hongo no tiene efectos ambientales adversos.
Así, también Eysker et al (2006), Ribeiro et al (2009) y Teixeira et al (2013) demostraron, no solo, que el uso masivo de clamidosporas de D. flagrans no produce efectos adversos en el ambiente, sino que además el hongo no sobrevive largos períodos en el mismo. D. flagrans y otras especies de hongos nematófagos utilizados como agentes de control biológico deben tenerse en cuenta como una medida profiláctica, ya que su acción se ve limitada a los estadios de vida libre de los nematodos gastrointestinales, por lo que debe combinarse con otras estrategias de control que actúen sobre las fases de vida parasitaria. Si bien es indudable que D. flagrans es el hongo con mayor potencial, otras especies como Monacrosporium thaumasium, Arthrobotrys oligospora y Arthrobotrys conoides también han demostrado eficacia en el control de nematodos gastrointestinales (Melo Magalhães et al, 2003; Eslami et al, 2005; Carvalho et al, 2009; Ribeiro Braga et al, 2010).

Endoparásitos

Estos hongos se caracterizan porque sus hifas crecen únicamente dentro del nematodo, exceptuando las hifas fértiles que crecen en el exterior. Según la especie, las esporas pueden ser ingeridas para penetrar en el interior del nematodo y posteriormente germinar; las esporas se pueden adherir y perforar la cutícula del nematodo o pueden presentar zoosporas móviles que parecen tener un tropismo positivo hacia los nematodos (de Oliveira Tavela et al, 2011).
Ensayos in vitro realizados con Harposporium anguillulae y Drechmeria coniospora demostraron una alta eficacia en la disminución de larvas en cultivos (Cezar et al, 2008; Kelly et al, 2009; Wachira et al, 2009). Sin embargo, el carácter de parásito obligado de este grupo de hongos limita su empleo como agentes de control biológico, ya que su dispersión, únicamente, se realiza por contacto directo entre individuos parasitados, necesitan un medio con alta concentración de agua para difundirse y aquellos que deben ser ingeridos solo serían activos contra los estadios parasitarios L1 y L2 que son los que se alimentan en el medio ambiente y no sobre la L3 infectante que al presentar cutícula doble no se alimenta y, por tanto, no sería atacada (Arroyo Balán et al, 2008; Ribeiro Braga et al, 2010).

Ovicidas

Los hongos ovicidas pueden ser usados para el control biológico de nematodos parásitos y especialmente nematodos fitopatógenos. En su mayoría son saprófitos, por lo que no dependen de la presencia de huevos en el medio; la mayoría de los estudios se han enfocado en la colonización de quistes conteniendo huevos de nematodos fitopatógenos (Milani Araujo et al, 2009). Existe un pequeño grupo de hongos especializados en el parasitismo de huevos de nematodos parásitos, entre los que se encuentra Verticillium chlamydosporium, capaz de infectar huevos de Ascaris lumbricoides (Ribeiro Braga et al 2010). Silva et al, (2010) propusieron dos (2) mecanismos de acción de penetración del hongo en el huevo: a través de la formación de un órgano específico de penetración en el sitio de contacto de la hifa con la cáscara del huevo o a través de una simple penetración de la hifa vegetativa a través de la cáscara del huevo.
Milani Araujo et al, (2009) aislaron varios géneros de hongos ovicidas siendo Paecilomyces lilacinus el que mejores resultados presentó para infectar huevos de Toxocara spp. Ensayos in vitro realizados con Pochonia chlamydosporia demostraron que este hongo destruye eficazmente huevos de Trichuris vulpis y sumado a esto se destacó la posible contribución en la disminución de la contaminación ambiental (Silva et al, 2010).

Administración de hongos nematófagos
Pellets de alginato de sodio

Una forma de administración estudiada con éxito en varias especies de animales domésticos es la incorporación de hongos nematófagos en pellets de alginato de sodio. De Oliveira Tavela et al (2013) demostraron que la incorporación de estos hongos en los pellets no afectó su capacidad predadora. Las especies de hongos nematófagos incorporadas con éxito en los pellets han sido Monacrosporium thaumasium y Arthrobotrys robusta. Después de administrar pellets conteniendo A. robusta por vía oral a ovinos, se ha logrado aislarlo en materia fecal, demostrando que el pasaje a través del tracto gastrointestinal no afecta la capacidad predadora del hongo (Ribeiro Braga et al, 2011).
De Araújo et al (2004) incorporaron D. flagrans y M. thaumasium respectivamente en pellets de alginato para ser administrados a ovinos con el fin de controlar larvas de Haemonchus contortus. Los ovinos utilizados recibieron una dosis oral de 1 g de pellets por 5 kilogramos de peso vivo una vez a la semana durante seis (6) meses, demostrando reducciones significativas en el número de huevos de nematodos en materia fecal y de larvas en los coprocultivos. La reducción significativa del número de larvas de H. contortus usando pellets de alginato conteniendo D. flagrans y M. thaumasium hace que este tipo de tratamiento pueda ser usado como una herramienta para el control biológico de nematodos gastrointestinales en ovinos.

Bolos de liberación controlada

Otra forma de administración de hongos nematófagos puede ser a través de bolos de liberación controlada (BLC) usados como dispositivos intrarruminales. Flores Crespo et al (1999) demostraron que las clamidosporas de D. flagrans fueron capaces de sobrevivir las presiones de fabricación al ser incorporadas dentro de matrices en la fabricación de prototipos intrarruminales de BLC donde las clamidosporas permanecieron viables durante nueve (9) meses dentro de los BLC almacenados a 4 °C. En estudios in vivo se observó que los bolos liberaron clamidosporas viables de forma constante hasta 23 días después de su colocación en el rumen; pasado ese período el dispositivo dejó de liberar clamidosporas correctamente (Baloyi et al, 2012). En el futuro se podrían usar los BLC si la contaminación de los pastos fuera riesgosa por la posible aparición de altas cantidades de larvas infectivas, la liberación de las clamidosporas por materia fecal sería, entonces, efectiva para disminuir el número de larvas migrando desde la materia fecal hacia las pasturas.

Granos de cereales con hongos nematófagos

Los granos de cereales proveen un sustrato ideal para el crecimiento y producción de gran cantidad de esporas de hongos nematófagos. Ketzis et al (2006) administraron diariamente cinco (5) g de cebada con 3×106 clamidosporas durante cinco (5) días, resultando suficiente para disminuir el número de larvas en materia fecal, cuando la misma fue cultivada en agar agua. Este método puede llegar a utilizarse en sistemas intensivos o cuando el estabulado constante de los animales forma parte de la rutina de manejo. Otra opción de aplicación sería mediante la suplementación en períodos nutricionalmente críticos para los animales, tales como el destete y el parto, períodos en que la excreción de huevos de parásitos por materia fecal es mayor (Oliva Carvalho et al, 2011).

Bloques energéticos

González et al (2005) incorporaron clamidosporas de D. flagrans en bloques energéticos. Se evaluaron a través de pruebas de eficacia la administración del mismo en ovinos donde explotaciones extensivas fueron contaminadas a partir de animales parasitados, una superficie alimentó animales que recibieron bloques con hongos y la otra animales que recibieron bloques sin hongos; posteriormente los animales fueron retirados y se introdujeron dos (2) grupos de animales libres de parásitos que permanecieron un mes pastoreando. Finalizado este período, se analizaron los animales para determinar el número y las especies de nematodos presentes en el tracto gastrointestinal, el porcentaje de eficacia del hongo sobre el total de la población parasitaria susceptible fue del 92%. Los bloques minerales como forma de administración de agentes de control biológico podrían utilizarse en producciones extensivas donde los animales son criados en pastoreo y su administración podría realizarse en los momentos en que la contaminación de la pastura es un riesgo para la salud animal (Ojeda-Robertos et al, 2008).

Bloques minerales

D. flagrans fue incorporado con éxito en bloques minerales. Bogum et al (2005) usaron ovinos que consumían el bloque mineral antes del inicio del tratamiento donde el hongo sobrevivió, en el bloque mineral, un mínimo de 18 semanas, cuando era almacenado a 4 °C. Un importante punto a considerar es el tiempo de vida de las esporas en los bloques, debido a su posible germinación si existiera humedad en el ambiente.
Las ventajas que presenta la administración de bloques minerales conteniendo clamidosporas de D. flagrans son el bajo costo y el doble propósito de su fabricación, ya que además de ser suplemento nutricional, es un vehículo ideal para los hongos nematófagos. Las desventajas de esta forma de administración son la variación del consumo que existe entre los animales y que es necesario su almacenamiento a una temperatura de 4 °C para evitar la absorción de humedad y la germinación de las clamidosporas, con la consecuente pérdida de la eficacia del bloque (Beynon, 2012). Los bloques minerales con clamidosporas podrían ser una forma de administración en sistemas productivos donde los animales son criados en pastoreo y podrían administrarse en los períodos de máxima contaminación de las pasturas para evitar así los picos de infectividad larvaria (Teixeira et al 2013).

Conclusión

El acelerado incremento de casos de resistencia antihelmíntica y la creciente demanda de alimentos inocuos para la salud humana y que sean obtenidos con tecnologías amigables con el medio ambiente, aumentan la necesidad de encontrar una alternativa para el control de las parasitosis gastrointestinales en los ovinos. Las investigaciones actuales se están centrando en la obtención de una forma de administración que sirva como vehículo para los hongos nematófagos capaces de atrapar y destruir larvas de nematodos gastrointestinales en la materia fecal. D. flagrans no es la única especie capaz de realizar el control biológico de nematodos gastrointestinales, como ha sido demostrado. En consecuencia, estudios con otras especies deberán ser estimulados.
Es claro que el control biológico no elimina la totalidad de los parásitos; sin embargo, es necesario evaluar su uso y conveniencia, considerando que a pesar de no actuar como los antihelmínticos eliminando más del 90% de los parásitos adultos en el animal, diversas investigaciones han demostrado que este método aplicado en campo alcanza niveles de eficacia que varían entre el 60 y 90% sobre la población de larvas infectantes en las pasturas. Dado que más del 95% de la población total de parásitos se encuentra en el ambiente, el control biológico actuaría sobre el punto de mayor importancia para el control de los nematodos gastrointestinales. Por otro lado, en Colombia los estudios de aislamiento e identificación de hongos nematófagos son escasos y no se pueden introducir especies fúngicas foráneas, porque dicha acción incrementaría el problema sanitario y provocaría una alteración ambiental en la región.